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大肠杆菌感受态细胞（competent cell）是分子克隆操作中的关键材料，所谓感受态细胞就是经过物理或化学方法处理过，细胞壁的通透性大大增强，更容易接受外源DNA进入的大肠杆菌细胞。
感受态细胞的制备方法有很多，如：电击法，CaCl2法，TFB法，TSS法等。还有一种最最简单的方法就是直接买法……
前段时间用TSS方法（大师兄告诉我的方法）制备了一次，用来做了几次克隆，效果还可以。TSS法（又称一步法）制备感受态细胞的操作流程如下：
将平板上单菌落转接到2ml液体LB培养基中，37℃震荡培养，过夜，然后将1ml转至50ml新鲜液体LB培养基中，37℃，震荡培养至OD600=0.2~0.4(大约需要2～3小时），离心后，用10ml TSS重悬，然后分装到1.5ml离心管，每管100微升，-70℃保存。
以上操作，尽量在冰上进行。
TSS配制方法：
7.0ml pH 6.1 LB培养基
2.0ml 50% PEG6000
0.5ml DMSO
0.2ml Mg2+ (0.1ml 1mol/L MgCl2 +0.1ml 1mol/L MgSO4)
0.3ml ddH2O
以上试剂分别灭菌，用时混合，DMSO不用灭菌。
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