高通量测序(High Throughput Sequencing)又称下一代测序(Next Generation Sequencing),也叫做深度测序(Deep Sequencing),最早由454公司开创,标志性事件是,2005年底454公司推出了革命性的基于焦磷酸测序(Pyrosequencing)的高通量基因组测序系统Genome Sequencer 20 System,后来454公司被Roche以1.55亿美元收购。高通量测序一般一次可以读取上百万甚至几百万条序列,数据量非常大。这种测序的用途很多,随便搜一下就可以找到很多相关资料,前面写的454测序也介绍了一点。个人觉得它的突出优点就是快速取得海量数据,可以摆脱存在Bias的PCR,既可以定性又可以定量。如果价格能够降低一些(现在运行一次要几万到十几万RMB,有点贵!),应该可以替代甚至淘汰很多操作麻烦的分子生物学方法。

高通量测序仪主要有来自三家公司:罗氏公司(Roche)的454测序仪(Roch GS FLX, FLX Titanium), Illumina公司的Illumina Genome Analyzer,HiSeq 2000和ABI的SOLiD测序仪(SOLiD system).

在网上看到华大基因仅Illumina HiSeq 2000和AB SOLiD 4.0 System这两种高通量测序仪到年底就会有超过150台,真多啊!

由于高通量测序的数据量非常大,后续分析工作就比较复杂,目前好像还没有非常成熟的软件能够完美处理高通量测序的结果。下面是两个用于高通量测序结果分析的工具:

1.RDP Pyrosequencing Pipeline (一个在线平台)
2.微软的Sequence Assembler (一个软件)

如果没做过高通量测序,而想先看看结果是什么样子的,可以从下面的页面下载高通量测序示例结果,包括Roche/454,Illumina/Solexa,ABI/SOLiD三种机型的数据:
http://www.clcbio.com/index.php?id=1290

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