按照T-RFLP操作流程得到数据后,需要对进行分析处理。T-RFLP数据分析软件有很多,GeneMarker是其中一个。分析T-RFLP数据的主要目的就是看有几个峰,每个峰所占的比例是多少,与Quantity One分析DGGE结果有点类似。使用GeneMarker分析T-RFLP结果的大致方法如下,比较粗略,具体各个参数的意义,请参考GeneMarker手册或相关教程:
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用MEGA构建了系统进化树之后,虽然TreeExplorer窗口中提供了一些功能对进化树进行优化和编辑,但似乎有些不足之处,比如要将树枝名称用不同的字体或不同颜色区别开来,好像就没法实现。例如下面这个图,不同树枝信息颜色不同:

偶然一次发现,原来可以用Word编辑,方法如下:
1. 将MEGA做好的进化树复制到Word中;
2. 右键点击图片,选择” Edit Picture”;
3. OK了,可以使用任何字体、任何颜色编辑进化树了。
MEGA 是一个非常优秀的序列比对和系统进化树构建软件,使用方便,完全免费,可从其网站下载, 最新版本是4.0。下面是用MEGA构建系统进化树的简明操作流程(具体细节请参考相关MEGA教程及使用说明):
1. 将要用于构建系统进化树的所有序列合并到同一个fasta格式文件,注意:所有序列的方向都要保持一致 ( 5’-3’)。
2. 打开MEGA软件,选择”Alignment” – “Alignment Explorer/CLUSTAL”,在对话框中选择Retrieve sequences from a file, 然后点OK,找到准备好的序列文件并打开。
3. 在打开的窗口中选择”Alignment”-“Align by ClustalX” 进行对齐,对齐过程需要一段时间,对齐完成后,最好将序列两端切齐,选择两端不齐的部分,单击右键,选择delete即可。
Solver是Excel一个功能非常强大的插件(Add-Ins),可用于工程上、经济学及其它一些学科中各种问题的优化求解,使用起来非常方便,Solver包括(但不限于)以下一些功能:
1、线性规划
2、非线性规划
3、线性回归,多元线性回归可以用Origin求解,也可以用Excel的linest函数或分析工具求解。
4、非线性回归
5、求函数在某区间内的极值
注意:Solver插件可以用于解决上面这些问题,并不是说上面这些问题Solver一定可以解决,而且有时候Solver给出的结果也不一定是最优的。
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Origin是美国OriginLab公司开发的数据分析和科学绘图软件,Origin目前的最新版本是:Origin 8(标准版本)和OriginPro 8(专业版本)
下面是5个不错的Origin教程,前三个是英文的,后两个是中文的:
(1)官方网站提供的教程:
http://www.originlab.com/www/helponline/Origin8/en/Tutorial/Tutorial.htm
可以按主题阅读,可以进行相关搜索。
(2)官方网站提供的PDF版本的使用手册:
http://www.originlab.com/pdfs/Origin_8_User_Guide.pdf
应该算是最经典,最权威的教程。
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